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提问人：网友 发布时间：
【单选题】

从 E．coli 中分离的连接酶：（）。

A、需要ATP作辅助因子

B、需要NAD作辅助因子

C、可以进行平末端和黏性末端连接

D、作用时不需要模板

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第1题
[] 假定你分离到一个E．coli 的 Thy-突变体，并推测有可能是ThyA 基因突变。请设计一个方案用PCR从染色体DNA扩增突变的ThyA 基因，测定突变的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

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第2题
[简答题] 怎样从一个 E．coli的 Hfr 菌株中分离到一个 F ’gal＋的菌株？

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第3题
[填空题] 原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶：E．coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶，它是从 T4 噬菌体感染的 E．coli 中分离的种单链多肽酶，分子量为——』Oa，由 T4 噬菌体基因——编码。E．coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码，也是一条多肽链的单体，分子量为（）kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异：第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同，TDNA连接酶用（），而 E．coli DNA连接酶则用（）作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同，在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E．coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件，E．coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的（）。

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第4题
[填空题] 为了提高重组 DNA 分子对 E.coli 的转化效率，通常可采取（）；处理和（）。

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第5题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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第6题
[判断题] T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶都能催化双链 DNA和单链 DNA的连接。

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第7题
[判断题] T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶作用时都需要 ATP和 NAD+作为辅助因子。

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第8题
[简答题] 一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。  （1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？  （2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？

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第9题
[填空题] （）年，美国斯坦福大学（）等在（）上发表了题为：“将新的遗传信息插入 SV40 病毒 DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和 E．coli 半乳糖操纵子的环状 SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有（）。

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第10题
[判断题] T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。

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