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提问人：网友 发布时间：
【问答题】

假定你分离到一个E．coli 的 Thy-突变体，并推测有可能是ThyA 基因突变。请设计一个方案用PCR从染色体DNA扩增突变的ThyA 基因，测定突变的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

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第1题
[简答题] 怎样从一个 E．coli的 Hfr 菌株中分离到一个 F ’gal＋的菌株？

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第2题
[填空题] 原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶：E．coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶，它是从 T4 噬菌体感染的 E．coli 中分离的种单链多肽酶，分子量为——』Oa，由 T4 噬菌体基因——编码。E．coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码，也是一条多肽链的单体，分子量为（）kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异：第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同，TDNA连接酶用（），而 E．coli DNA连接酶则用（）作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同，在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E．coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件，E．coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的（）。

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第3题
[简答题] 现分离到 X82 噬菌体的一个突变型，它同野生型的噬菌斑相当不同，并已分离到这两种噬菌体的 DNA，请设计一个实验，初步鉴定是点突变、插入突变还是缺失突变？

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第4题
[简答题] 你已经分离了一个新的 F’因子， 怎样用最简便的方法知道最初的 F因子的部分 DNA已经被切除，并被一个外源DNA（也就是细菌DNA）所替代？

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第5题
[填空题] 为了提高重组 DNA 分子对 E.coli 的转化效率，通常可采取（）；处理和（）。

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第6题
[简答题] 欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物（如 E．coli）中进行表达，克隆时应注意哪些问题？

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第7题
[简答题] 欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物（如 E．coli）中进行表达，克隆时应注意哪些问题？

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第8题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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第9题
[判断题] T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶都能催化双链 DNA和单链 DNA的连接。

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