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提问人：网友 发布时间：
【填空题】

为了提高重组 DNA 分子对 E.coli 的转化效率，通常可采取（）；处理和（）。

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更多“为了提高重组 DNA 分子对 E.coli 的转化效率，通常可采取（）；处理和（）。”相关的问题
第1题
[判断题] 为了保证重组 DNA分子在受体细胞中能够稳定地独立存在下来，通常用 rec－r－m－表型的细胞株作为受体菌。

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第2题
[简答题] 以 pBR322 DNA作为载体，从四环素抗性基因区克隆外源 DNA 时，可采用环丝氨酸富集法筛选重组体，说明其基本原理和基本操作过程。

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第3题
[简答题] λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。       为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。载体和cDNA分子要经过怎样的处理才能提高产生重组 DNA分子的效率？

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第4题
[填空题] 由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同， SC  DNA 的泳动速度（），OC  DNA 泳动速度（），L DNA居中，通过凝胶电泳和 EB染色的方法可将不同构型的 DNA分别开来。

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第5题
[填空题] Cohen 等在（）年构建了第一个有功能的重组 DNA分子。

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第6题
[单选题] EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要（）。

A、用65℃处理5～10分钟使限制性内切核酸酶失活  B、用CIP处理载体DNA防止自身环化  C、进行琼脂糖凝胶电泳监测  D、上述说法都正确  

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第7题
[判断题] 反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以 RNA 为模板合成的 DNA 是互补 DNA（complementary DNA，cDNA）。若是以DNA模板合成 DNA，dNTP 的掺人速度很低（约 5个核苷酸／秒），比 T7DNA聚合酶的合成速度差不多低 100 倍。

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第8题
[判断题] 双重药物选择法富集哺乳动物细胞中稀有重组体的原理是：一种药物用于选择以任意方式整合外源 DNA的细胞，第二种药物杀死带有随机整合 DNA的细胞。

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第9题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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