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提问人：网友 发布时间：
【问答题】

用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到 A基因，但在后者的克隆中未筛选到 A基因，请说明原因。

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第1题
[简答题] 在 Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用 EcoRI 切割了 R6-5 质粒，然后转化 E．coliC600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了 pSCl02，它是由 R6-5 的三个 EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性？

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第2题
[简答题] Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

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第3题
[单选题] EcoRI切割载体 DNA 和供体 DNA 所产生的片段在用于重组连接前要（）。

A、用65℃处理5～10分钟使限制性内切核酸酶失活  B、用CIP处理载体DNA防止自身环化  C、进行琼脂糖凝胶电泳监测  D、上述说法都正确  

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第4题
[简答题] 一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。  （1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？  （2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？

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第5题
[简答题] 某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

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第6题
[单选题] 限制性内切核酸酶 EcoRI 在野生型的丸噬菌体 DNA 中有 5 个切点、Hind Ⅲ有 7 个切点，BamH I也有 5 个切点。调整这些酶切位点的数量，主要通过（）。

A、体内突变  B、完全酶切后连接  C、部分酶切  D、先用甲基化酶修饰后再酶切  

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第7题
[简答题] 用 Sal I切割从噬菌体 J2 分离的DNA时，得到 8 个片段，分别是：1.3、2.8、3.6、5.3、7.4、7.6、8.1 和11.4kb。但是，用 SaI I 切割从被感染的寄主细胞中分离到的 J2 噬菌体DNA 时，只得到 7 个片段，分别是：1.3、2.8、7.4、7.6、8.1、8.9 和 11.4kb，根据这些结果，您得到哪些信息？

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第8题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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第9题
[填空题] 如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。

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