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提问人：网友 发布时间：
【填空题】

欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 分子转变成平末端的双链形式，通常可采用（）或（）。

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第1题
[填空题] 从小牛胸腺中分离纯化的末端转移酶催化的基本反应是将（），同时释放出离的无机磷。催化反应时不需（），但需要引物，单链 DNA是最好的引物单链 DNA 受体的长度最短需有（）个 dNTP。具有 3，突出末端的双链 DNA是较好的反应底物。二价离子和DNA末端状态对催化反应影响较大，但是用（）为辅助离子，可以催化任何形式的末端（突出的、隐含的、平齐的）加接单核苷酸，但突出的 3’端效率较高。以Mn2+ ／Mg2+作为辅助因子，只能在单链DNA或双链 DNA3’突出端加尾。

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第2题
[填空题] Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链 DNA分子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物的（）。

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第3题
[] 某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后，产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。

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第4题
[填空题] Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在 20~40kDa，通常由（）亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA，或 DNA／RNA 杂合链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有（）专一性，也具有（）的专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有（），产生（）末端的DNA片段或（）的DNA片段。作用时需要（）作辅助因子，但不需要（）和（）。

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第5题
[填空题] λ外切核酸酶可从双链 DNA 的 5’端依次切下 5’单核苷酸，但对不同末端的底物来说，作用效率不同，（）最高，（）最低。

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第6题
[判断题] 具有 EcoRⅡ末端的外源片段只能以一个方向插入到 EcoRⅡ末端的载体中。

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第7题
[判断题] 具有 EcoRⅡ末端的外源片段只能以一个方向插入到 EcoRⅡ末端的载体中。

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第8题
[简答题] 用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末端，该酶在 lac 基因内有切割位点，并在第二个氨基酸密码子内，该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后，用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端，然后重新连接成环，转化 Lac-Tets受体菌，筛选 Tet 转化子，问：Lacr的基因型是什么？并说明原因。

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第9题
[] 下列DNA不是λ外切核酸酶作用底物的是（）。

A、A.具有3’突出端的双链DNA  B、B.具有5’突出端的双链DNA  C、C.切口DNA  D、D.平末端DNA  

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