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【填空题】

Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链 DNA分子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物的（）。

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第1题
[] 某一质粒载体具有 Tetr和 Kanr的表型，在 Kan抗性基因内有一 Bgl I的切点。现用 Bgl I切割该载体进行基因克隆，问：（1）转化后涂皿时应加什么样的抗生素？（2）培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型？（3）如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体？

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第2题
[简答题] 已知298.2K时下列反应的△rHrm=-46.02kJ·mol-1和各组分的标准摩尔生成吉布斯能                               C2H4(g)+ H2O(g)=C2H5OH (g) △fGөm(kJ·mol-1) 68.178 -228.59 -168.6 分别计算298.2K和500K时的标准平衡常数Kө。

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第3题
[填空题] SDS 是分离 DNA时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用：（1）（）；  （2）（）；      （3）（）；  （4）（）。

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第4题
[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：  对照1：   将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；        对照2：   将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照3：   将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照4：   将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细 菌细胞涂布在培养平板上。        在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第5题
[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：  对照1：   将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；        对照2：   将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照3：   将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照4：   将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细 菌细胞涂布在培养平板上。        在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第6题
[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：  对照1：   将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；        对照2：   将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照3：   将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；   对照4：   将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细 菌细胞涂布在培养平板上。        在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第7题
[填空题] T4 DNA 聚合酶与 Klenow酶一样，具有 5’→ 3’，聚合酶和 3’→ 5’外切酶两种性，但是它的 3’→ 5’外切酶的活性比 Klenow酶强（）倍。该酶的 3’→ 5’外切活性既能作用于单链 DNA 也能作用于双链 DNA，不过作用于（）的活性要强于（）链。

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第8题
[填空题] 由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同， SC  DNA 的泳动速度（），OC  DNA 泳动速度（），L DNA居中，通过凝胶电泳和 EB染色的方法可将不同构型的 DNA分别开来。

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第9题
[单选题] A free market is an economic system in which the price of goods and services is affected by supply and demand rather than controlled by a government. 这句话翻译成中文是（）

A、自由市场是一种经济体系，其中的商品和服务价格往往受供给和需求的影响，而不是由政府来控制  B、在一个自由的市场经济体系中，商品和服务的价格是由供给和需求所决定，而不是受政府的影响。  C、自由市场是一种经济体系，在这个体系中，商品和服务的价格不仅由供给和需求所决定，也由政府来控制。  

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