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【简答题】

如何使用甲基化酶对克隆 DNA 进行保护？有什么意义？

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第1题
[单选题] 限制性内切核酸酶 EcoRI 在野生型的丸噬菌体 DNA 中有 5 个切点、Hind Ⅲ有 7 个切点，BamH I也有 5 个切点。调整这些酶切位点的数量，主要通过（）。

A、体内突变  B、完全酶切后连接  C、部分酶切  D、先用甲基化酶修饰后再酶切  

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第2题
[判断题] 基因组 DNA文库是含有某一生物中全部 DNA 序列随机克隆的克隆群，而 cDNA 文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。

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第3题
[单选题] Ⅱ型限制性内切核酸酶：（）。

A、有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列  B、仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供  C、限制性识别非甲基化的核苷酸序列  D、有外切核酸酶和甲基化酶活性  E、仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供  

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第4题
[] 用 EcoRI和 HindⅢ分别切割同一来源的染色体 DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到 A基因，但在后者的克隆中未筛选到 A基因，请说明原因。

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第5题
[填空题] 呼吸作用中的氧化酶（）酶对温度不敏（）酶对温度却很敏感，对氧的亲和力强，而（）酶和（）酶对氧的亲和力较弱。

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第6题
[单选题] 下列关于建立 cDNA 文库的叙述中，哪一项是错误的？（）

A、从特定组织或细胞中提取DNA或RNA  B、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA  C、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA  D、新合成的双链DNA甲基化  

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第7题
[简答题] 基因克隆是如何使含有单个基因的 DNA片段得到纯化的？

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第8题
[填空题] Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链 DNA分子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物的（）。

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第9题
[] 下列关于建立 cDNA 文库的叙述中，哪一项是错误的？（）

A、A.从特定组织或细胞中提取DNA或RNA  B、B.用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA  C、C.以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA  D、D.新合成的双链DNA甲基化  

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