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【简答题】

简述 DNA和 RNA连接酶的催化反应机制。

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第1题
[填空题] 由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同， SC  DNA 的泳动速度（），OC  DNA 泳动速度（），L DNA居中，通过凝胶电泳和 EB染色的方法可将不同构型的 DNA分别开来。

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第2题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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第3题
[判断题] λ外切核酸酶不能在双链 DNA 的 gap 和nick 处切割 DNA。

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第4题
[判断题] 反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以 RNA 为模板合成的 DNA 是互补 DNA（complementary DNA，cDNA）。若是以DNA模板合成 DNA，dNTP 的掺人速度很低（约 5个核苷酸／秒），比 T7DNA聚合酶的合成速度差不多低 100 倍。

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第5题
[判断题] λ噬菌体 DNA和 M13 单链噬菌体 DNA在成熟前的 DNA复制都是用滚环模型。

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第6题
[] 反向转录酶除具有以 DNA 和 RNA为模板合成 DNA 的 5’→ 3’合成酶的活性外，还具有4 种酶的活性：（1）（）；（2）（）； （3）（）；（4）（）。

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第7题
[简答题] Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

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第8题
[判断题] T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶都能催化双链 DNA和单链 DNA的连接。

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第9题
[填空题] 用乙醇沉淀 DNA时，通常要在 DNA溶液中加入单价的阳离子，如 NaCl 和 NaAc，其目的是（）。

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第10题
[填空题] T4 DNA 聚合酶与 Klenow酶一样，具有 5’→ 3’，聚合酶和 3’→ 5’外切酶两种性，但是它的 3’→ 5’外切酶的活性比 Klenow酶强（）倍。该酶的 3’→ 5’外切活性既能作用于单链 DNA 也能作用于双链 DNA，不过作用于（）的活性要强于（）链。

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