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【单选题】

1948年（）的细菌转化实验证明了DNA是遗传物质。

A、Avery

B、Watson

C、Crick

D、Chargaff

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第1题

[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中 9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带，另三个克隆中切出一个cDNA 片段，实验终于获得成功。你如何看待第一次的实验结果？对照 1 的目的是什么？

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第2题

[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第3题

[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第4题

[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中&#

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第5题

[简答题] 在R型细菌的培养基中加入S型细菌的DNA，所有细菌都发生转化了吗？

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第6题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。你如何看待第一次的实验结果？对照1的目的是什么？

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第7题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。第三次实验如何进行转化子的挑选？并说明其原理？

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第8题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。影响第二次实验结果的原因是什么？对照2的作用何在？

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第9题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。对照3和4各有什么作用？

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