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【简答题】

说明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

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第1题

[填空题] Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别（）个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有（）倾向，即它们在识别序列中含量较高。 8．EcoK是 I类限制性内切核酸酶，分子组成是α2 β2 γ，分子量 300kDa。在这些亚基中，o 亚基具有（）作用；β亚基具有（）的活性；γ亚基的作用则是（）。

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第2题

[填空题] 严格地说限制性内切核酸酶（restriction endonuclease）是指已被证明是（）的酶。基因工程中把那些具有识别（）的内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。

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第3题

[填空题] 第一个分离的限制性内切核酸酶是（）；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（）。

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第4题

[简答题] 双酶消化法（doubledigests）绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。

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第5题

[判断题] 用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。

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第6题

[填空题] 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的（）。

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第7题

[单选题] Ⅱ型限制性内切核酸酶：（）。

A、有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 B、仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 C、限制性识别非甲基化的核苷酸序列 D、有外切核酸酶和甲基化酶活性 E、仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供

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第8题

[判断题] 基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。

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第9题

[填空题] 如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。

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