目的基因和载体的连接方式有有（）、（）和（）。..

第1题

[多选题] 基因工程一般步骤（）。

A、目的基因的分离 B、目的基因与载体连接，组成重组DNA分子 C、目的基因阳筛 D、重组DNA分子输入受体细胞，筛选鉴定和无性系化，获得目的基因表达产品

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第2题

[单选题] DNA重组体的构建是指（）。

A、对目的DNA片段作选择性扩增和表达的检测 B、选择目的基因和表达载体 C、将目的基因和载体在体外重组

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第3题

[简答题] 连接目的基因与载体的方法有哪些？

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第4题

[单选题] 转基因技术流程的第三步为（）。

A、基因表达载体的构建 B、目的基因的获取 C、目的基因的检测和表达 D、将目的基因导入受体细胞

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第5题

[单选题] 基因克隆技术包括把来自不同生物的（）同有自主复制能力的（）在体外人工连接，构建成新的重组DNA，然后送入受体生物中去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。

A、DNA；脱氧核苷酸 B、基因；载体DNA C、基因；脱氧核苷酸 D、DNA；载体DNA

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第6题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。你如何看待第一次的实验结果？对照1的目的是什么？

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第7题

[单选题] 对基因工程载体的描述，下列哪个不正确？（）

A、都可以转入宿主细胞 B、都有限制性核酸内切酶的识别位点 C、都可以连接进目的基因 D、都是环状双链DNA分子 E、都有筛选标志

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第8题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。对照3和4各有什么作用？

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第9题

[简答题] 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？

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目的基因和载体的连接方式有有（）、（）和（）。

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