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【判断题】

插入到质粒 DNA中的 EB 可以用正丁醇抽提除去。

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第1题
[单选题] CsCl-EB密度梯度离心法纯化质粒 DNA的原理是：（）。

A、氯化铯可以较多地插入到线状DNA中  B、氯化铯可以较多地插入到SCDNA中  C、EB可以较多地插入到线状DNA中  D、EB可以较多地插入到SCDNA中  

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第2题
[简答题] 一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。  （1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？  （2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？

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第3题
[判断题] 限制性内切核酸酶在 DNA中的识别／切割位点的二级／三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要 20倍。

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第4题
[填空题] 由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同， SC  DNA 的泳动速度（），OC  DNA 泳动速度（），L DNA居中，通过凝胶电泳和 EB染色的方法可将不同构型的 DNA分别开来。

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第5题
[判断题] Agarose-EB 电泳法分离纯化 CCC DNA 原理是根据 EB 可以较多地插入到 CCC DNA 中，因而迁移速度较快。

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第6题
[简答题] λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。       为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。载体和cDNA分子要经过怎样的处理才能提高产生重组 DNA分子的效率？

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第7题
[简答题] 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。 绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl 的限制性图谱，并标明四环素抗性基因的位置；

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第8题
[判断题] CsCl-EB密度梯度离心法纯化 SC DNA原理是根据EB可以较多地插入到SC DNA中，因而沉降速度较快。

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第9题
[] 超离心法纯化质粒DNA时，选用 CsCl 作介质的优点是： （1）（）（2）（），从而使不同分子量的DNA分子得以分开。

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