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用 BamHI切割一重组质粒 DNA 分子并从中分离纯化了两个 DNA片段，一段长400bp，另一段长 900bp。现在希望将这两个片段重新连接起来，得到如图 1 所示的结果。 <br />
于是将这两种片段混合起来，并在连接酶的存在下进行温育，分别在 30 分钟和 8 小时取样进行凝胶电泳分析，令人惊讶的是，连接产物并非是理想中的 1．3kb的重组分子，而是一种复杂的片段模式（图 A）。同时发现随着温育时间的延长，较小片段的浓度逐渐降低，大片段的浓度逐渐增加。如果用 BamHI来切割连接后的混合物，则起始的片段可以重新产生（图 A）。 <br />
从凝胶中分离纯化出 1．3kb 的片段，并取出一部分用 BamHI进行切割，以检查它的结构。正如预料的一样，出现了两个原始的带（图 B）。但是用 EcoRI切割另一部分样品，希望能够产生两个 300bp 和一个长度为 700bp 的核苷酸片段，然而，凝胶电泳的结果，令人惊奇（图 B）。<br />
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<img src="https://nimg.ppkao.com/2018-05/wangjing/2018052916551476046.jpg?sign=4671721af54c23624f3a3c78a16d89d4&t=62d47d0b" />
在原始连接混合物中为什么有如此多的带？”相关的问题
A、用BamHI切割一重组质粒DNA分子并从中分离纯化了两个DNA片段，一段长400bp，另一段长900bp。现在希望将这两个片段重新连接起来，得到如图1所示的结果。
于是将这两种片段混合起来，并在连接酶的存在下进行温育，分别在30分钟和8小时取样进行凝胶电泳分析，令人惊讶的是，连接产物并非是理想中的1．3kb的重组分子，而是一种复杂的片段模式（图A）。同时发现随着温育时间的延长，较小片段的浓度逐渐降低，大片段的浓度逐渐增加。如果用BamHI来切割连接后的混合物，则起始的片段可以重新产生（图A）。
从凝胶中分离纯化出1．3kb的片段，并取出一部分用BamHI进行切割，以检查它的结构。正如预料的一样，出现了两个原始的带（图B）。但是用EcoRI切割另一部分样品，希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段，然而，凝胶电泳的结果，令人惊奇（图B）。
A、它的分子量较小，易于进入细胞 B、含有抗四环素（TetR）和抗氨苄青霉素（AmpR）的基因 C、若用EcoRI切割该质粒，不破坏它的两个抗生素抗性基因 D、用BamHI限制酶切割pBR322质粒，将破坏它的抗氨苄青霉素基因
A、Klenow酶是一种DNA聚合酶 B、合成的双链DNA有72个碱基对 C、EcoRI和BamHI双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接 D、筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因
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