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【简答题】

在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个 6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？

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更多“在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个 6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？”相关的问题
第1题
[填空题] 限制性内切核酸酶 Acy I识别的序列是 5’—GRCGYG-3’，其中R（），Y（）。

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第2题
[填空题] Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别（）个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有（）倾向，即它们在识别序列中含量较高。  8．EcoK是 I类限制性内切核酸酶，分子组成是α2 β2 γ，分子量 300kDa。在这些亚基中，o 亚基具有（）作用；β亚基具有（） 的活性；γ亚基的作用则是（）。

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第3题
[简答题] λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。       为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。假定载体长为 43kb，cDNA 的平均长度是 lkb，请估计在连接混合物中，载体分子同cDNA 的比例是多少？

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第4题
[简答题] λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。       为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。载体和cDNA分子要经过怎样的处理才能提高产生重组 DNA分子的效率？

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第5题
[判断题] PCR 既能用于扩增任何天然存在的核苷酸序列，又能重新设计任何天然核苷酸序列的两个末端。因此，任意两个天然存在的 DNA序列都能快速有效的扩增，并拼接在一起。

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第6题
[简答题] 用 Klenow 酶填补的办法可使 5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使 DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

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第7题
[] 假定你分离到一个E．coli 的 Thy-突变体，并推测有可能是ThyA 基因突变。请设计一个方案用PCR从染色体DNA扩增突变的ThyA 基因，测定突变的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

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第8题
[简答题] YAC 载体具有什么样的功能性 DNA’序列？为什么在克隆大片段时，YAC 具有优性？

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第9题
[填空题] Sal I和Not I都是哺乳动物中识别序列稀有的酶，在哺乳动物基因组的 5kb 片段中，找到 NotI切点的概率是（）。

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