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提问人：网友 发布时间：
【多选题】

在 DNA的酶切反应系统中，通常：（）。

A、用 SSC 缓冲液

B、加入Mg2+作辅助因子

C、加入BSA等保护剂

D、上述说法中，有两项是正确的

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第1题
[判断题] 限制性内切核酸酶在 DNA中的识别／切割位点的二级／三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要 20倍。

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第2题
[单选题] 限制性内切核酸酶 EcoRI 在野生型的丸噬菌体 DNA 中有 5 个切点、Hind Ⅲ有 7 个切点，BamH I也有 5 个切点。调整这些酶切位点的数量，主要通过（）。

A、体内突变  B、完全酶切后连接  C、部分酶切  D、先用甲基化酶修饰后再酶切  

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第3题
[] 在酶切反应管加完各种反应物后，需要离心 2 秒钟，其目的是（）和（）。

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第4题
[单选题] 一环状DNA分子，设其长度为1。已知某种限制性内切酶在该分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果该DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生0．3、0．5、0．2三种不同长度的DNA片段。现有多个上述DNA分子，若在每个分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些DNA分子最多能产生长度不同的线状DNA的种类数是（）

A、4  B、5  C、6  D、7  

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第5题
[单选题] 用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（）。

A、含有复制原点，抗选择基因  B、含有复制原点，合适的酶切位点  C、抗性基因，合适的酶切位点  

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第6题
[判断题] 甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶的星活性的主要原因之一，防止的办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在 5％以下。

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第7题
[简答题] 在酶切反应缓冲液中加入 BSA的目的是什么？机理是什么？

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第8题
[简答题] 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？

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第9题
[单选题] 在下列进行 DNA部分酶切的条件中，控制那一项最好？（）。

A、反应时间  B、酶量  C、反应体积  D、酶反应的温度  

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