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【简答题】

用平板划线法和稀释涂布平板法获得的菌落在分布上有什么不同？

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第1题

[单选题] 实验室测定好氧微生物活菌数最常采用的方法是（）

A、平板划线法 B、滤膜培养法 C、涂布平板法 D、稀释平板法 E、液体培养法

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第2题

[简答题] 可进行选择性计数的方法是( )。A.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法最快的细菌计数方法是( )。A.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法活菌计数最准确的方法是( )。A.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法请帮忙给出每个问题的正确答案和分析，谢谢！A.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法最快的细菌计数方法是(B.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法活菌计数最准确的方法是(C.显微镜直接计数法B.MPN法C.倾注平板计数法D.微菌落快速计数法E.表面涂布计数法

A、A.显微镜直接计数法
B.MPN法
C.倾注平板计数法
D.微菌落快速计数法
E.表面涂布计数法
最快的细菌计数方法是(
B.显微镜直接计数法
B.MPN法
C.倾注平板计数法
D.微菌落快速计数法
E.表面涂布计数法
活菌计数最准确的方法是(
C.显微镜直接计数法
B.MPN法
C.倾注平板计数法
D.微菌落快速计数法
E.表面涂布计数法

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第3题

[单选题] 通过平板划线法获得可疑菌落，下图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④⑤。下列操作方法正确的是（）

A、操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B、划线操作须在火焰上进行 C、在⑤区域中才可以得到所需菌落 D、在①②③④⑤区域中划线前后都要对接种环灭菌

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第4题

[单选题] 培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是（）

A、微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂 B、不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌 C、接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法 D、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌

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第5题

[] 获得单个菌落的方法有（）

A、A.倾注法 B、B.涂布法 C、C.划线法

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第6题

[判断题] 若两个连续稀释度的平板菌落数在适宜的计数范围内，第一稀释度（1：100）的菌落数为282和288，第二个稀释度的菌落数为73和85，则样品中菌落数是3.31×104。

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第7题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。对照3和4各有什么作用？

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第8题

[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验：将pdc基因（丙酮酸脱羧酶）克隆到pUC18载体中，以便在E.coli TOP10中表达，这个pdc基因两侧具有BamHI的位点，因此计划将它从BamHI的位点插入载体中。实验严格按分子克隆实验手册中进行：载体用BamHI切割后，立即用碱性磷酸酶处理，接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc基因混合，加入T4连接酶进行温育，连接后，将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布在加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养基的平板上。实验中同时设置了4个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用T4连接酶连接（但没有pdc基因）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（见下表1）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没菌落生长（见下表1）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（见下表1）。从实验平板上挑出12个菌落，分离质粒DNA，并用BamHI进行切割，其中9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带，另3个克隆中切出一个pdc基因，实验终于获得成功。为什么要用碱性磷酸酶处理载体？

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第9题

[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体，以便在 E．coli 中大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点，因此计划将它从 BamHI的位点插入载体中。实验严格地按照克隆手册中的方法进行：载体用 BamHI切割以后，立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸；接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合，加入 DNA连接酶后进行温育，连接之后，将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在加有抗生素固体培养基的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性基因，所以，转化的细菌能够存活。实验中同时设置了 4 个对照：对照1：将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照2：将未切割载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照3：将经切割（但未用碱性磷酸酶处理）并用连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上；对照4：将经切割（并用碱性磷酸酶处理过）并用 DNA连接酶连接（但没有cDNA片段）的载体转化过的细菌细胞涂布在培养平板上。在进行第一次实验时，感受态细胞不是自己制备的，结果，在所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落（表 2）。在第二次实验中，自己制备感受态细胞，但这一次，所有的平板上都没有菌落生长（表 2）。接着又进行了第三次实验，这次得到了转化子（表 2）。从实验平板上挑出 12 个菌落，分离了质粒 DNA，并用 BamHI进行切割，其中 9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带，另三个克隆中切出一个cDNA 片段，实验终于获得成功。你如何看待第一次的实验结果？对照 1 的目的是什么？

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