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提问人:网友 发布时间:
【简答题】

有一个十六寡聚核苷酸,经RNaseT1酶水解得到:Gp,UpCpCpA,ApCpUpCpGp和ApUpUpCpCpGp,用RNaseA酶水解得到:1A,5Cp,2Up,ApUp和GpGpApCp,写出十六寡聚核苷酸的顺序。

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第3题

A、λYES(酵母—大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体,这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成,它兼病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分,然后它能在体外被包装入病毒颗粒中,包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌,λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组,并进行独立复制,这就可以从质粒中分离出来,以便进行进一步的遗传操作。 为了最大限度地提高克隆效率,载体用只一个切点的限制性内切核酸XhoI(5’-CTCGAG)进行切割,然后在dTTP存在的情况下,同DNA一起进行温育。将一种具平末端的双链cDNA同一段含由两段苷酸组成的双链苷酸接头连接起来,这两段苷酸的序列是:5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC,它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA,构建了一个4×10个克隆的cDNA文库。  

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第6题

A、λYES(酵母—大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体,这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成,它兼病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分,然后它能在体外被包装入病毒颗粒中,包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌,λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组,并进行独立复制,这就可以从质粒中分离出来,以便进行进一步的遗传操作。 为了最大限度地提高克隆效率,载体用只一个切点的限制性内切核酸XhoI(5’-CTCGAG)进行切割,然后在dTTP存在的情况下,同DNA一起进行温育。将一种具平末端的双链cDNA同一段含由两段苷酸组成的双链苷酸接头连接起来,这两段苷酸的序列是:5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC,它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA,构建了一个4×10个克隆的cDNA文库。  

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第8题

A、A.RNA核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多苷酸链  B、B.RNA需要引物,并在生长的多苷酸链的5’端加上苷酸  C、C.DNA能在苷酸链的两端加上苷酸  D、D.所RNA和DNA只能在生长的多苷酸链的3’端加上苷酸  

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