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【简答题】

用限制性内切核酸酶切割 DNA 后，经电泳检查，发现有拖尾现象，其可能的原因是什么？

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第1题
[填空题] 如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。

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第2题
[判断题] 用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。

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第3题
[判断题] 用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。

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第4题
[判断题] 限制性内切核酸酶在 DNA中的识别／切割位点的二级／三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要 20倍。

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第5题
[填空题] Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别（）个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有（）倾向，即它们在识别序列中含量较高。  8．EcoK是 I类限制性内切核酸酶，分子组成是α2 β2 γ，分子量 300kDa。在这些亚基中，o 亚基具有（）作用；β亚基具有（） 的活性；γ亚基的作用则是（）。

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第6题
[填空题] 由于 DNA是由 4 种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是（）。

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第7题
[判断题] 用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。

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第8题
[判断题] 同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。

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第9题
[填空题] 严格地说限制性内切核酸酶（restriction endonuclease）是指已被证明是（）的酶。基因工程中把那些具有识别（）的内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。

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