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提问人:网友 发布时间:
【单选题】

在进行DNA重组实验中,首先要获得目的基因,一般不使用下面哪种方法()。

A、从细胞内部总DNA提取分离目的基因

B、构建基因文库,从中调取目的基因

C、以mRNA为模板,逆转录合成互补的DNA片段

D、利用PCR特异性地扩增所需要的目的基因

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第1题

A、催化DNA相邻的3’-OH末端和5’-磷酸之间形成磷酸二酯键  B、DNA的体外重组,用于具有粘性末端DNA分子之间的连接  C、DNA的体外重组,用于平末端DNA分子之间的连接  D、催化DNA的5’-OH末端和3’-磷酸之间形成磷酸二酯键  

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第2题

A、目的因的分离  B、目的因与载体连接,组成重组DNA分子  C、目的因阳筛  D、重组DNA分子输入受体细胞,筛选鉴定和无性系化,获得目的因表达产品  

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第3题

A、A.不同来源的的两段DNA单链的复性  B、B.目的因与载体的连接物  C、C.不同来原的DNA分子的连接物  D、D.原核DNA与真核DNA的连接物  E、E.两个不同的结构因形成的连接物  

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第4题

A、对目的DNA片段作选择性扩增和表达的检测  B、选择目的因和表达载体  C、将目的因和载体体外重组  

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第5题

A、同源重组过程,一定发生DNA链的断裂  B、DNA链的断裂,一定诱发同源重组  C、同源重组发生于同源染色体之间,而不是发生于相同的DNA序列之间  D、DNA序列相同与否,不会显著影响同源重组的效率  E、同源重组只发生于因之间的DNA区段,而不会发生因内部  

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第6题
[简答题] 打算将一个 cDNA 克隆到一个表达载体,以便 E.coli 大量制备相应的蛋白质。这个cDNA 的两侧具有 BamHI的位点,因此计划将它从 BamHI的位点插入载体实验严格地按照克隆手册的方法进行:载体用 BamHI切割以后,立即用碱性磷酸酶处理除去 5’磷酸;接着将处理过的载体同用 BamHI切割的 cDNA 片段混合,加入 DNA连接酶后进行温育,连接之后,将 DNA 同已处理过的可以接受 DNA的细菌感受态细胞混合。最后,将混合物涂布加有抗生素固体培养的平板上。由于载体上带有抗生素的抗性因,所以,转化的细菌能够存活。实验同时设置了 4 个对照: 对照1: 将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布培养平板上; 对照2: 将未切割载体转化过的细菌细胞涂布培养平板上; 对照3: 将经切割(但未用碱性磷酸酶处理)并用连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细菌细胞涂布培养平板上; 对照4: 将经切割(并用碱性磷酸酶处理过)并用 DNA连接酶连接(但没有cDNA片段)的载体转化过的细 菌细胞涂布培养平板上。 进行第一次实验时,感受态细胞不是自己制备的,结果,所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落(表 2)。第二次实验,自己制备感受态细胞,但这一次,所有的平板上都没有菌落生长(表 2)。接着又进行了第三次实验,这次得到了转化子(表 2)。从实验平板上挑出 12 个菌落,分离了质粒 DNA,并用 BamHI进行切割,其 9个克隆产生大小同载体一样的单一的一条带,另三个克隆切出一个cDNA 片段,实验终于获得成功。 你如何看待第一次的实验结果?对照 1 的目的是什么?

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第8题

A、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→转化→得到重组DNA克隆  B、构建重组DNA分子→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆→转化  C、构建重组DNA分子→转化→选择增殖细胞克隆→得到重组DNA克隆  D、细胞克隆选择增殖→构建重组DNA分子→转化→得到重组DNA克隆  

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第9题
[简答题] 我们实验室研究生做了一个如下的实验:将pdc因(丙酮酸脱羧酶)克隆到pUC18载体,以便E.coli TOP10表达,这个pdc因两侧具有BamHI的位点,因此计划将它从BamHI的位点插入载体实验严格按分子克隆实验手册进行:载体用BamHI切割后,立即用碱性磷酸酶处理,接着将处理过的载体同用BamHI切割的pdc因混合,加入T4连接酶进行温育,连接后,将DNA同处理过的可以接受外源DNA的E.coli TOP10感受态细胞混合。最后将混合物涂布加有氨苄青霉素、IPTG和x-gal固体培养的平板上。 实验同时设置了4个对照: 对照1:将未同任何载体接触过的细菌细胞涂布培养平板上。 对照2:将未切割载体转化过的细菌细胞涂布培养平板上。 对照3:将经切割(但未用碱性磷酸酶处理)并用T4连接酶连接(但没有pdc因)的载体转化过的细菌细胞涂布培养平板上。 对照4:将经切割(并用碱性磷酸酶处理过)并用T4连接酶连接(但没有pdc因)的载体转化过的细菌细胞涂布培养平板上。 进行第一次实验时,感受态细胞不是自己制备的,结果,所有的平板上都长出了多到无法计数的菌落(见下表1)。第二次实验,自己制备感受态细胞,但这一次,所有的平板上都没菌落生长(见下表1)。接着又进行了第三次实验,这次得到了转化子(见下表1)。从实验平板上挑出12个菌落,分离质粒DNA,并用BamHI进行切割,其9个克隆产生大小同载体pUC18一样的单一的一条带,另3个克隆切出一个pdc因,实验终于获得成功。 你如何看待第一次的实验结果?对照1的目的是什么?

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